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Communication Dans Un Congrès Année : 2010

Générateur de cavitation reproductible : exemples d'application biologique in-vitro

Résumé

La cavitation ultrasonore peut conduire à différents types d'effets biologiques en fonction de son intensité. Ces effets, très destructeurs, présents en lithotritie, en hyperthermie par HIFU ou en histotritie, peuvent aussi réaliser, pour des intensités moindres, des pores cellulaires de taille suffisante pour permettre l'entrée de particules, de matériels génétiques ou de produits chimiques. Dans ces dernières applications, la cavitation n'apparait pas systématiquement et les expérimentations nécessitent souvent des adjuvants comme les produits de contraste utilisés comme germes de cavitation. Nous avons développé un générateur continu de cavitation, travaillant dans la plage d'intensité acoustique de 0.2 à 3.5 W/cm2, et régulé (cadencement : 5 ms) sur un indice de cavitation (CI) établi à partir du signal acoustique émis par la cavitation. Ce dispositif, de part la reproductibilité du processus de cavitation générée, a permis de caractériser en sonodynamothérapie les effets potentialisateurs d'un photosensibilisant (Photofrin©) et de transfecter des cellules non-adhérentes ( RL du lymphome folliculaire ou LLC de Leucémie Lymphoïde Chronique) très difficiles à transfecter de par ailleurs (électroporation, lipofection). Le Photofrin, additionné au milieu de culture (incubation de 30 min), potentialise l'effet cytotoxique induit par cavitation de sa phase stable à transitoire avec une liaison très forte avec le CI (r2>0.95). Nos travaux ont montré une plus grande sensibilité des membranes cellulaires aux contraintes mécaniques induite par le Photofrin. Dans l'étude du dysfonctionnement des mécanismes régulateurs de l'apoptose des LLC par le ciblage des gènes responsables de la chimiorésistance, la transfection de siRNAs correspondants a pu être réalisée. Les taux de transfection sont reproductibles de 10% pour le plasmide PeGFP à près de 60% pour un SiRNA (fluoroscein) avec une mortalité résiduelle réduite à 10%. Ce dispositif a aussi permis d'élaborer un modèle de tumeur fluorescent par une transfection « stable » de plasmides pour des études de tumorogénèse.
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Dates et versions

hal-00541716 , version 1 (01-12-2010)

Identifiants

  • HAL Id : hal-00541716 , version 1

Citer

Jean-Louis Mestas, Johny El-Maalouf, Lina Reslan, Claude Inserra, Bruno Gilles, et al.. Générateur de cavitation reproductible : exemples d'application biologique in-vitro. 10ème Congrès Français d'Acoustique, Apr 2010, Lyon, France. ⟨hal-00541716⟩
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