Caractérisation de souches de portage asymptomatique de Listeria monocytogenes isolées chez l'Homme : Evaluation des capacités invasives et étude de leur survie en milieu acide et en présence de sels biliaires - Archive ouverte HAL Accéder directement au contenu
Thèse Année : 2003

Characterization of Listeria monocytogenes isolates carried asymptomatically by Human: Assessment of invasive potential and tolerance to acid stress and bile salts

Caractérisation de souches de portage asymptomatique de Listeria monocytogenes isolées chez l'Homme : Evaluation des capacités invasives et étude de leur survie en milieu acide et en présence de sels biliaires

Maïwenn Olier

Résumé

While the gut is the final reservoir separating the external environment from the host tissues, it can harbor strains of Listeria monocytogenes following ingestion of contaminated food. The criteria required to reach the intestine are related to the stresses encountered in the host. The first criterion analyzed is the ability of the strain to activate its glutamate decarboxylase (GAD) at acidic pH because this system would protect the strain from the acidity of the stomach. Fecal carriage strains are particularly resistant to the acidity of the medium simulating gastric fluids in the presence of glutamate. Few foodborne strains possess levels of GAD activity comparable to those observed for asymptomatic carriage strains and strains responsible for human listeriosis cases. The resistance of L. monocytogenes to bile salts is common to all the strains studied, regardless of their origin. The study of the invasive capacities of the 14 strains of asymptomatic carriage in the host cell showed that 10 strains of fecal carriage had an attenuated level of virulence on the 14-day-old embryonated chicken egg in contrast to the strains linked to epidemic or sporadic episodes. Five of these asymptomatic carriage strains have reduced abilities to enter the Caco-2 epithelial cell in culture. Internalin A, a bacterial virulence protein involved in epithelial cell entry, appears to be the deficient factor for these 5 strains. Analysis of partial sequences of the inlA gene allowed the detection of point mutations responsible for the appearance of premature stop codons and the production of the truncated forms of Internalin A observed by Western-blot. The use of PCR-RFLP on the variable regions of the inlA gene of strains of various origins allowed us to detect the presence of this deficiency in strains of food origin. The frequency of this type of potentially non-invasive strains in food could therefore explain, at least in part, the existence of asymptomatic carriage and the relatively low incidence of listeriosis cases in proportion to the estimated frequency of ingested L. monocytogenes.
Alors que l’intestin est le dernier réservoir qui sépare le milieu extérieur des tissus de l’hôte, il peut héberger des souches de Listeria monocytogenes suite à l’ingestion d’aliments contaminés. Les critères requis pour parvenir dans l’intestin sont liés aux stress rencontrés chez l’hôte. Le premier critère analysé est la capacité de la souche à activer sa glutamate décarboxylase (GAD) à pH acide car ce système protégerait la souche de l’acidité de l’estomac. Les souches de portage fécal résistent particulièrement bien à l’acidité du milieu simulant les fluides gastriques en présence de glutamate. Peu de souches d’origine alimentaire possédent des niveaux d’activité GAD comparables à ceux observés pour les souches de portage asymptomatique et les souches responsables de cas de listériose chez l’Homme. La résistance de L. monocytogenes aux sels biliaires est par contre un caractère commun à l’ensemble des souches étudiées quelle que soit leur origine. L’étude des capacités invasives des 14 souches de portage asymptomatique dans la cellule hôte a montré que 10 souches de portage fécal avaient un niveau de virulence atténué sur l’œuf embryonné de poulet de 14 jours contrairement aux souches liées à des épisodes épidémiques ou sporadiques. Cinq de ces souches de portage asymptomatique ont des capacités réduites d’entrée dans la cellule épithéliale Caco-2 en culture. L’Internaline A, une protéine de virulence bactérienne impliquée dans l’entrée de la bactérie dans la cellule épithéliale, apparaît être le facteur déficient pour ces 5 souches. L’analyse de séquences partielles du gène inlA a permis de déceler des mutations ponctuelles responsables de l’apparition de codons stop prématurés et de la production des formes tronquées d’Internaline A observées par Western-blot. L’utilisation de la PCR-RFLP sur les régions variables du gène inlA de souches d’origines diverses nous a permis de détecter la présence de cette déficience chez des souches d’origine alimentaire. La fréquence de ce type de souches potentiellement non invasives dans l’aliment pourrait donc expliquer au moins en partie, l’existence du portage asymptomatique et l’incidence relativement faible de cas de listérioses en proportion de la fréquence estimée de L. monocytogenes ingérées.
Fichier principal
Vignette du fichier
Thèse Olier M. 2003.pdf (4.94 Mo) Télécharger le fichier
Origine : Fichiers produits par l'(les) auteur(s)

Dates et versions

tel-03576407 , version 1 (16-02-2022)

Identifiants

  • HAL Id : tel-03576407 , version 1

Citer

Maïwenn Olier. Caractérisation de souches de portage asymptomatique de Listeria monocytogenes isolées chez l'Homme : Evaluation des capacités invasives et étude de leur survie en milieu acide et en présence de sels biliaires. Alimentation et Nutrition. UFR Sciences de la vie et de la santé. Université de Bourgogne, 2003. Français. ⟨NNT : ⟩. ⟨tel-03576407⟩
73 Consultations
90 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More