Etant un isotope de l'hydrogène, le tritium est ubiquiste et peut être intégré dans la plupart des molécules constitutives du vivant, notamment dans l'eau et les molécules organiques. Que ce soit pour la surveillance de l'environnement ou dans la recherche, la mesure du tritium dans des matrices biologiques se fait généralement dans leur eau libre ainsi que dans leur matière sèche et nécessite ainsi une séparation systématique de ces deux compartiments. Les principales techniques d'extraction d'eau utilisées sont la lyophilisation et la distillation (azéotropique ou non, sous pression réduite ou atmosphérique). Il est montré que l'extraction de l'eau libre est susceptible d'induire des biais sensibles et systématiques dans les mesures du tritium de l'eau libre et du tritium lié de ces matrices. Afin de quantifier l'effet de chacune des sources de biais et d'essayer de comprendre les mécanismes en jeu, différentes hypothèses ont été testées en supposant : - que la technique d'extraction d'eau ait un effet sur les activités mesurées, - que la masse de l'échantillon traité ait une influence sur les résultats, - que le taux d'eau extrait influe sur les activités tritium mesurées, - que la nature de la matrice traitée puisse influer sur ces résultats. Les résultats valident chacune des hypothèses et quantifient les biais induits : - les techniques de distillations donnent des résultats proches alors que les activités mesurées sur l'eau extraite par lyophilisation ont une plus grande dispersion et activité moyenne nettement plus élevées, - la dispersion des activités mesurées sur les échantillons apparaît comme inversement proportionnelle à la masse de l'échantillon dans la plage testée, - le taux d'extraction de l'eau libre influe sur la pertinence de la mesure du fait d'une discrimination isotopique marquée qui conduit à l'enrichissement de l'eau restant dans la matière sèche et donc à l'appauvrissement de l'eau extraite jusqu'à l'assèchement total de l'échantillon, - outre la facilité à extraire l'eau de la matrice, la nature de l'échantillon influence également le " profil " de la discrimination isotopique au cours de l'avancement de la déshydratation. Ces résultats permettent ainsi de mettre en évidence les précautions à prendre pour limiter les erreurs ou pouvoir, le cas échéant, les estimer de manière fine. Ils mettent également en évidence des " profils " originaux de discrimination isotopique, spécifiques des matrices considérées. Cela pose la question de l'enrichissement artificiel du tritium organique échangeable au cours de l'extraction d'eau et cela soulève également des questions sur les techniques d'évaluation du tritium organique non-échangeable dans une matrice. : est-ce que la déduction d'un ratio théorique " tritium organique échangeable " sur " tritium organique total " permet de s'affranchir, dans des conditions satisfaisantes, de l'échange labile pour l'estimation/ du tritium organique non-échangeable ?