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Article Dans Une Revue Optica Année : 2023

Super-resolved total internal reflection fluorescence microscopy using random illuminations

Guillaume Maire
  • Fonction : Auteur
Laurent Gallais
ILM
Julien Savatier
  • Fonction : Auteur
Md Rasedujjaman
  • Fonction : Auteur
Loïc Le Goff
Jérôme Idier
Thomas Mangeat
Anne Sentenac
  • Fonction : Auteur

Résumé

A benefit of random illumination microscopy (RIM) is that it improves the resolution and linearity of the brightness of structured illumination microscopy using minimally controlled speckled illumination. Here, we implemented RIM in the total internal reflection fluorescence (TIRF) configuration for imaging biological processes close to the coverslip surface. Using standard TIRF objectives, we separated fluorescent lines 60 nm apart and achieved high contrast 86 nm resolution on fixed biological samples. Applied to live macrophages, TIRF-RIM provided two-color dynamic images of paxillin nanoclusters with remarkable spatial (96-120 nm) and temporal (1-8 Hz) resolutions, respectively. The simple experimental setup and imaging protocol together with the robustness of the data processing to leaks and aberrations make TIRF-RIM a method of choice for super-resolution TIRF imaging.
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Affannoukoué et al. - 2023 - Super-resolved total internal reflection fluoresce.pdf (21.66 Mo) Télécharger le fichier
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Dates et versions

hal-04172900 , version 1 (28-07-2023)

Identifiants

Citer

Kévin Affannoukoué, Simon Labouesse, Guillaume Maire, Laurent Gallais, Julien Savatier, et al.. Super-resolved total internal reflection fluorescence microscopy using random illuminations. Optica, 2023, 10 (8), pp.1009. ⟨10.1364/optica.487003⟩. ⟨hal-04172900⟩
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