Purification, partial characterization, and reactivity with aromatic compounds of two laccases from Marasmius quercophilus strain 17 - Archive ouverte HAL Accéder directement au contenu
Article Dans Une Revue Canadian Journal of Microbiology Année : 2000

Purification, partial characterization, and reactivity with aromatic compounds of two laccases from Marasmius quercophilus strain 17

Résumé

Two isozymes of laccase were obtained from an induced liquid culture of Marasmius quercophilus with p-hydroxybenzoic acid as the inducer. Both the constitutive and the induced isozyme have a molecular mass of 60 kDa as determined by polyacrylamide gel electrophoresis. Using isoelectric focusing, we found three isozymes with the constitutive enzyme (pI 4, 4.2, 4.4) and four of the induced form (pI 4.75, 4.85, 4.95, 5.1). We observed certain differences between these two isozymes; the specific activity of the induced isozyme was twice as high, and two optimum pH levels (5 and 6) were observed with the induced isozyme (only one, pH 5, for the constitutive isozyme). However, both of these enzymes have the same thermal stability and the same temperature for their highest activity (80°C). Furthermore, the reactivity of both these enzymes with aromatic compounds was similar. The use of mediators extended the oxidized substrate range of the laccases studied. Various products of degradation were observed, depending on the mediator used. When laccase was used alone, the decrease of the signal corresponding to the aromatic cycle, without any formations of other peaks at different wavelengths, suggested polymerisation of aromatic compounds
Deux isozymes de laccases ont été obtenues à partir d'une culture liquide induite de Marasmius quercophi-lus en utilisant l'acide p-hydroxybenzoïque comme inducteur. Les isozymes constitutives et induites ont toutes deux un poids moléculaire de 60 kDa mesuré en électrophorèse sur gel de polyacrylamide. En électrofocalisation, nous avons observé trois isozymes pour l'enzyme constitutive (pI 4, 4.2, 4.4) et quatre pour l'isozyme induite (pI 4.75, 4.85, 4.95, 5.1). Nous avons observé certaines différences entre ces deux isozymes; l'activité spécifique de l'isozyme induite était deux fois plus importante que celle de l'isozyme constitutive et deux pH optimum (5 et 6) ont été notés pour l'isozyme induite (seulement un, pH 5, pour l'isozyme constitutive). Les deux enzymes avaient la même stabilité ther-mique et la même température d'activité maximale (80°C). De plus, la réactivité de ces deux laccases vis-à-vis des composés aromatiques était semblable. L'utilisation de médiateurs a augmenté la gamme des substrats oxydés par les laccases étudiées. Différents produits de dégradation ont été observés selon le médiateur utilisé. Quand seule la laccase est utilisée, la diminution du signal correspondant au composé aromatique et l'absence d'autres pics à différentes lon-gueurs d'ondes, suggèrent une polymérisation des composés aromatiques.
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hal-02071815 , version 1 (18-03-2019)

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Citer

Anne Marie Farnet da Silva, S Criquet, S Tagger, G Gil, J. Le Petit. Purification, partial characterization, and reactivity with aromatic compounds of two laccases from Marasmius quercophilus strain 17. Canadian Journal of Microbiology, 2000, 46 (3), pp.189-194. ⟨10.1139/w99-138⟩. ⟨hal-02071815⟩
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