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Article Dans Une Revue Revue Française d'Histotechnologie Année : 2013

Le turnover des cellules dans la glande mammaire évalué par immunohistochimie, comme indicateur de la production de lait

Résumé

La glande mammaire est un organe dont la fonction principale est la synthèse du lait. Cette synthèse se fait au niveau de structures appelées acini mammaires qui sont essentiellement composés d’une couche de cellules sécrétrices polarisées secrétant du lait : les cellules épithéliales mammaires (CEM). Au cours de la lactation, un turnover permanent des cellules mammaires est assuré par une prolifération et une mort cellulaire pour maintenir la production laitière. Existe-t-il un lien entre le turnover des CEM et la production du lait ? Pour étudier ceci, nous avons développé au sein du laboratoire, deux techniques de marquage en immunofluorescence des tissus mammaires prélevés par biopsie. La première technique est la détection des cellules en prolifération à l’aide du marquage en immunofluorescence indirect de PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen). PCNA est une protéine plus abondamment exprimée dans la phase S de la mitose lors de la réplication de l’ADN. La seconde technique est la méthode TUNEL de détection des cellules mortes basée sur l’utilisation d’une enzyme (terminale transférase). Cette enzyme s’incorpore aux extrémités 3’OH de la molécule d’ADN, une base marquée mettant en évidence la fragmentation des brins d’ADN spécifiques des cellules mortes par apoptose. On marque aussi grâce au DAPI l’ensemble des noyaux des cellules sur la coupe, on peut alors calculer un ratio entre l’ensemble des cellules et les cellules exprimant PCNA ou celles marquées en apoptose, ce qui permet d’estimer le pourcentage de cellules en prolifération ou en mort cellulaire. Une expérience sur des chèvres laitières a été conduite visant à étudier l’effet de l’accumulation de lait pendant 36h dans une demi-mamelle, tandis que l’autre demi-mamelle était traite 2 fois/ jour correspondant à une accumulation de lait de 12h. La production du lait dans la demi-mamelle ayant subi une accumulation de lait de 36h a été de 1,3 kg contre 2,5 kg dans l’autre demi-mamelle. Des biopsies ont été effectuées sur les deux demi-mamelles. La baisse de production de lait s’est accompagnée d’une baisse du nombre de cellules marquées par un anticorps dirigé contre PCNA entre les 2 demi-mamelles (19,8 % contre 9,3 % pour respectivement 12h et 36h) tandis que la mort cellulaire a augmenté (0,15 % contre 0,63 % pour respectivement 12h et 36h). Une corrélation entre la production de lait et le turnover des cellules mammaires semble donc exister.

Mots clés

Fichier non déposé

Dates et versions

hal-01210606 , version 1 (02-10-2015)

Identifiants

  • HAL Id : hal-01210606 , version 1
  • PRODINRA : 264197

Citer

Sandra Wiart, Hedi Ben Chedly, Marion Boutinaud. Le turnover des cellules dans la glande mammaire évalué par immunohistochimie, comme indicateur de la production de lait. Revue Française d'Histotechnologie, 2013, 26 (1), pp.31-41. ⟨hal-01210606⟩
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