Impact des désinfectants sur la viabilité bactérienne de Vibrio parahaemolyticus en biofilm Impact of disinfectants on the bacterial viability of Vibrio parahaemolyticus in biofilm
Résumé
Vibrio parahaemolyticus est une bactérie pathogène ubiquitaire des milieux marins responsable de la vibriose humaine. Cette bactérie est associée à la majorité des cas de vibriose ayant pour origine la consommation de produits de la pêche ou de l’aquaculture contaminés, entrainant des symptômes gastrointestinaux. Cet agent pathogène représente un enjeu sanitaire et économique majeur, notamment aux Etats-Unis, en Chine et au Japon, où il est la première cause d’infection alimentaire1. Selon l’Autorité européenne de sécurité des aliments (EFSA), sa prévalence est en hausse depuis 20 ans et devrait encore augmenter dans les années à venir en raison du réchauffement des océans, faisant de cette bactérie un agent pathogène émergent. La contamination des aliments par V. parahaemolyticus peut survenir dans le milieu naturel (eau de mer) mais également à la suite d’un contact avec une surface contaminée lors de la transformation du produit. Une épidémie de vibriose survenue en septembre 2017 en Corée touchant 237 individus a mis en évidence que la source de contamination à V. parahaemolyticus provenait d’un couteau et d’une planche à découper2. Cela suggère donc que la présence de V. parahaemolyticus sur ces surfaces aurait entrainé la contamination croisée des aliments. En effet, V. parahaemolyticus est capable de persister sous forme de biofilm sur différentes surfaces, dont les équipements industriels, entrainant de sérieux problèmes de sécurité sanitaire. Afin de lutter contre les biofilms de V. parahaemolyticus, les industriels ont recours à des procédures de nettoyage et de désinfection. Parmi les désinfectants utilisés, les ammoniums quaternaires (AQ) représentent les principaux désinfectants dans la filière des produits de la pêche et de l'aquaculture. Cependant, l'émergence de résistances bactériennes pousse les professionnels à se tourner vers d'autres molécules, comme les triamines3. Aucune étude n’a encore évalué l’efficacité de ces désinfectants sur les biofilms de V. parahaemolyticus couramment présents dans les ateliers de transformation alimentaire. L’objectif de cette étude a donc été d’évaluer la capacité des biofilms de V. parahaemolyticus à résister à un désinfectant à base d’AQ et à un désinfectant à base de triamine. Ils ont été appliqués selon les recommandations pour la désinfection des surfaces industrielles (standard EN1276), sur des biofilms de 24h formé sur acier inoxydable. Nous avons quantifié les population totales, viables et viables cultivables (VC) par qPCR, PMA-qPCR et dénombrement sur gélose, respectivement. Ces données ont été complétées par des observations au microscope à épifluorescence après coloration des biofilms traités et non traités, à l’aide du kit Live/Dead. Notre étude a montré que les deux traitements ne tuaient pas les cellules bactériennes dans les biofilms, mais induisaient un état viable non cultivable (VNC). Nous avons également observé des populations totales et viables plus importantes dans les biofilms traités à l’AQ. Les observations microscopiques ont confirmé la présence de bactéries viables dans les biofilms traités, avec une densité cellulaire plus élevée, après traitement à l’AQ.
Domaines
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