Communication Dans Un Congrès Année : 2024

La spécificité de la matrice extracellulaire du testicule pourrait être nécessaire à la production d’organoïdes testiculaires chez les poissons

Agnès Burel
  • Fonction : Auteur
  • PersonId : 1065360
Francis Gouttefangeas

Résumé

Les mécanismes impliqués dans le renouvèlement et le recrutement des cellules germinales souches adultes (GSC) restent très mal connus chez les poissons. Les organoïdes pourraient permettre de reproduire in vitro une structure primitive de la niche germinale qui faciliterait l’étude des interactions cellulaires et moléculaires entre les GSC et les cellules somatiques de la niche germinale. Nos premiers essais de culture 3D de cellules testiculaires préalablement dissociées et incluses dans une matrice commerciale (Matrigel, Vitrogel) ont permis de produire des agrégats de novo présentant une organisation. Cependant, ces structures sont restées limitées en nombre et en taille sur une durée de 10 jours. Ces limitations pourraient être dues à l’utilisation de matrices extracellulaires inappropriées. En effet, les matrices extracellulaires (ECM), dont la composition varie d’un tissu à l’autre, jouent un rôle crucial dans le contrôle de la survie, de l’ancrage, de la prolifération et de la différenciation cellulaire. Elles exercent leurs activités en appliquant une contrainte mécanique et/ou en jouant un rôle de médiation de signaux extracellulaires. La présente étude vise à caractériser, pour la première fois chez les poissons (truite Arc-en-ciel immature), les composants de l’ECM testiculaire après décellularisation. L’intégrité structurale de l’ECM (fibres de collagène, membranes basales…) a été vérifiée par microscopie électronique (SEM et TEM) avant l’identification de ses composés protéiques par une approche protéomique à haut débit (DIA-PASEF). Deux autres conditions expérimentales ont été générées (testicules entiers snap-freeze, testicules préalablement congelés puis lavés en présence de PBS) afin de démontrer l’enrichissement des protéines matricielles dans le groupe d’échantillons testiculaires décellularisés. Nous avons détecté un total de 15 672 protéines dans chacune de nos conditions expérimentales dont 99% correspondent à des gènes à copie unique ou dupliquée. 544 gènes (3.5%) codent pour des protéines matricielles répertoriées dans la base MatrisomeDB2.0 (2023). L’analyse des profils d’abondance protéique différentiels a mis en évidence 6 clusters comprenant 9 721 protéines dont 402 appartiennent au matrisome. L’un de ces clusters regroupe la majorité des protéines matricielles (230/402) avec une prépondérance de protéines du core matriciel (collagènes, glycoprotéines dont les laminines). Les analyses de Gene Ontology et de l’interactome confirment un enrichissement exclusif en GO termes liés aux différentes structures du compartiment extracellulaire (fibres de collagène, membrane basale). Une méta-analyse incluant des études transcriptomiques à haut débit sur sept tissus des deux sexes montre que plusieurs constituants de ces matrices sont exprimés spécifiquement dans les testicules et sont même pour certains spécifiques des poissons. Leur absence dans les matrices commerciales disponibles pourrait expliquer en tout ou partie l’échec de la production d’organoïdes.

Fichier non déposé

Dates et versions

hal-04805813 , version 1 (26-11-2024)

Identifiants

  • HAL Id : hal-04805813 , version 1

Citer

Nathalie Chenais, Aurélien Brionne, Blandine Guével, Regis Lavigne, Agnès Burel, et al.. La spécificité de la matrice extracellulaire du testicule pourrait être nécessaire à la production d’organoïdes testiculaires chez les poissons. Organoïdes et recherche agronomique, INRAE (département PHASE), Nov 2024, Rennes, France. ⟨hal-04805813⟩
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