L’écosystème de l’accompagnement entrepreneurial est composé d’une multitude d’acteurs diversifiés avec des objectifs stratégiques variés. Au sein de cet écosystème, les incubateurs jouent un rôle crucial car ils constituent le pont entre les entrepreneurs et l’environnement externe de l’incubateur. Pour le faire, ils développent des stratégies de coopération ou de compétition avec les autres acteurs de l’écosystème. Notre étude vise à explorer ces relations en mobilisant les concepts de l’écosystème et des stratégies des incubateurs. Par ailleurs, nous utilisons la théorie de l’alignement stratégique comme cadre intégrateur des concepts mobilisés. L’étude explore l’articulation des stratégies de spécialisation ou de diversification (alignement interne) avec celles de la coopétition (alignement externe) dans le contexte de l’écosystème de l’accompagnement entrepreneurial. Le cadre méthodologie s’appuie sur une étude exploratoire qualitative basée sur cinq études de cas liées aux principaux types d’incubateurs identifiés : les incubateurs du développement économique, les incubateurs technologiques, les incubateurs académiques, les incubateurs sociaux et les incubateurs privés. Au total, 48 entretiens semi-directifs ont été réalisés auprès des différents acteurs de l’écosystème de l’accompagnement entrepreneurial en France, complétés par des données secondaires. Cette méthodologie écosystémique vise à promouvoir une approche holistique des relations stratégiques au sein de l’écosystème de l’accompagnement entrepreneurial en croisant les visions stratégiques de différents membres. Les principaux résultats de notre étude montrent que les incubateurs se différencient en utilisant diverses combinaisons des stratégies individuelles et collectives en lien avec leurs caractéristiques organisationnelles et environnementales. Les incubateurs sociaux et académiques se différencient grâce à la coopétition dominée par la coopération, les incubateurs technologiques et privés grâce à la coopétition dominée par la compétition et les incubateurs du développement économique grâce à la coopétition équilibrée entre la coopération et la compétition. Grâce à ces résultats, l’étude offre une meilleure compréhension de l’écosystème de l’accompagnement entrepreneurial tant pour les responsables des incubateurs que pour les politiques publiques.