La lipolyse d’assemblages lipoprotéiques complexes tels que le globule gras laitier est très fréquente notamment durant la phase néonatale1. Cette lipolyse est initiée dans l’estomac par la lipase gastrique humaine qui agit à pH acide et possède des propriétés biochimiques et biophysiques uniques lui permettant d’initier l’attaque du globule gras, ce qui favorise ensuite l’action de la lipase pancréatique. La lipolyse est une réaction interfaciale qui nécessite avant la phase catalytique stricte une étape d’adsorption de la lipase gastrique sur cette interface2. Les interactions qui gouvernent l’adsorption de la lipase gastrique sur la membrane du globule gras ne sont pas totalement élucidées. L’objectif de ce travail était donc d’élucider ces interactions ainsi que la distribution latérale de la lipase gastrique dans des membranes modèles présentant une coexistence de phases identique à celle observée dans la membrane du globule gras. Une lipase gastrique recombinante de chien (rDGL) a été utilisée comme modèle à la lipase gastrique humaine. Une combinaison d’outils biophysiques de la plateforme BioMIF (ellipsométrie, tensiométrie et microscopie de force atomique) a été mise en œuvre pour caractériser l’adsorption de la rDGL dans les membranes modèles3. Des films de Langmuir ont été utilisés pour imiter le feuillet extérieur de la membrane du globule gras. Des mélanges de glycérophospholipides et extraits de babeurre présentant différentes phases physiques, charges de surface et densités moléculaires ont permis d’identifier les interactions enzyme/membrane gouvernant l’adsorption. Nous avons montré que: 1.La rDGL présente une forte affinité pour les interfaces lipide/liquide. Néanmoins, si une grande partie des molécules est proche de l’interface un nombre restreint de molécules s’insère à l’interface. 2. La rDGL s’adsorbe préférentiellement dans la phase liquide expansée et aux frontières des deux phases, l’adsorption se fait à trois niveaux de profondeur dans la membrane (h1~5.5 nm, h2<4 nm, and h3<2 nm) et impacte fortement l’organisation latérale de la monocouche de lipide (Figure); 3. L’addition de charges négatives via l’addition de phosphatidylsérine favorise l’adsorption; ainsi en plus des interactions hydrophobes, l’adsorption de la rDGL est favorisée par des interactions électrostatiques qui ont été approchée par la modélisation du potentiel de surface de la rDGL. Une montée massive de la rDGL à proximité du substrat peut favoriser une prélipolyse rapide avant la vidange gastrique. L’application de ces outils biophysiques dans des multicouches supportées pourra permettre de mieux approcher la complexité de la membrane du globule gras. Ces outils pourront également être appliqués à d’autres lipases digestives d’intérêt pour la digestion néonatale.