Développement et validation d'une méthode d'analyse de médicaments dans des invertébrés benthiques d'eau douce par nano chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem. - Archive ouverte HAL Accéder directement au contenu
Communication Dans Un Congrès Année : 2011

Développement et validation d'une méthode d'analyse de médicaments dans des invertébrés benthiques d'eau douce par nano chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem.

Résumé

L'industrialisation et l'utilisation de produits chimiques dans la vie courante sont responsables de la dissémination dans l'environnement de substances très variées (médicaments, pesticides), pour lesquelles les conséquences sur l'environnement ne sont que progressivement mises en évidence. Un des enjeux majeurs des sciences environnementales aujourd'hui est d'évaluer le risque lié à la dispersion dans les écosystèmes de ces contaminants et leurs conséquences. Si quelques travaux ont tenté de mesurer des conséquences biologiques d'une exposition à différents contaminants organiques sur des invertébrés aquatiques d'eau douce (insecte, crustacé, cnidaire), peu de données, voire aucune n'est disponible quant à la contamination des invertébrés aquatiques benthiques des milieux, pourtant à la base de l'évaluation de l'état des écosystèmes. Ce manque d'informations s'explique notamment par l'absence de méthodologies analytiques adaptées aux matrices environnementales biotiques de très petite taille. L'objectif de cette étude est de développer une méthodologie analytique adaptée aux matrices environnementales biotiques de très petite taille et pesant seulement quelques centaines de microgrammes. La complexité et la très faible quantité de l'échantillon rendent d'autant plus délicates, aussi bien l'étape d'extraction que l'analyse proprement dite. En effet, les substances recherchées à l'état de traces dans des matrices complexes de si petite taille nécessitent la miniaturisation des techniques existantes et l'utilisation de technologies de pointe : la nano chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem (nano-LC-nano-ESI MS/MS) qui permet d'augmenter la sensibilité des analyses, de diminuer ainsi les limites de détection et de pouvoir répondre à ces enjeux écotoxicologiques. Une des étapes clé de ces analyses reste la préparation des échantillons, aussi avons nous optimisé cette étape en comparant différentes techniques d'extraction : la méthode QuEChERS dans une " version miniaturisée " avec ou sans étape de purification par SPE dispersive, une extraction sur résine avec ou sans étape de purification par SPE dispersive. Après optimisation, la méthode d'extraction la plus efficace, simple et rapide est basée sur la méthode " micro-QuEChERS " sans étape de purification par SPE dispersive La validation a permis de déterminer que la méthode est robuste pouvant atteindre des limites de détection compatibles avec la recherche de contaminants environnementaux. Pour la carbamazépine et la fluoxétine, la LOD est respectivement de 4 ng/g et de 30 ng/g pour une prise initiale d'un individu d'une dizaine de milligrammes. Grâce aux limites de détection atteintes, cette méthodologie a été appliquée avec succès à l'analyse des différents gastéropodes qui ont été exposés à différents concentrations de fluoxétine (11, 33 ou 100 μg/L) pendant 7 et 14 jours. Ces gastéropodes ont montré des différences significatives de réponse à la fluoxétine (malformation des gonades...). L'examen des résultats obtenus en nano-LC-nano MS/MS montre une bioconcentration plus importante pour l'espèce la plus sensible à la fluoxétine (Potamopyrgus antipodarum).
Fichier non déposé

Dates et versions

hal-00591960 , version 1 (10-05-2011)

Identifiants

  • HAL Id : hal-00591960 , version 1

Citer

Audrey Buleté, Marion Gust, Robert Baudot, Laure Wiest, Jeanne Garric, et al.. Développement et validation d'une méthode d'analyse de médicaments dans des invertébrés benthiques d'eau douce par nano chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse en tandem.. 9ème congrès francophone de l'AfSep sur les sciences séparatives et les couplages, Mar 2011, Toulouse, France. ⟨hal-00591960⟩
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